Introduction. To examine the amounts and role of growth factors in different tissues and corporal fluid, new sensitive techniques have to be developed. A major problem is that the normal concentration of trophic substances, such as nerve growth factor (NGF), in central and peripheral nervous system and in fluids is very low (ng-pg/ml). A valuable method of research is the sensitive two-site enzyme immunoassay using the monoclonal antibody 27/21 to mouse NGF. Materials and methods. The present work applied this enzyme immunoassay to examine the NGF levels in normal non-human primate sera (n= 94) and applied this assay to study of NGF levels in two non-human primate receiving NGF infusion: one young and one aged. Two groups of non-human primate sera were studied one young-adult (n= 69) and one aged (n= 25). The serum samples NGF treated non-human primate were taken before the infusion and at the 1st week and 1st, 3rd, 6th and 12th month after infusion. Results. To further test the specificity of conjugate binding, dilutions of the non-human primate sera were preincubated with an excess of monoclonal NGF antibody 27/21 in solution. With this strategy it was possible to completely block the signal obtained using the enzyme immunoassay. We found very low levels of NGF in aged monkeys (0.054 ng/ml) when compared with young-adult group (0.152 ng/ml) (p> 0.01). The NGF levels in aged non-human primate treatment with NGF was very low before (0.50 ng/ml) and during NGF treatment evolution time, whereas at the the 12th month showed an increase in NGF levels (0.180 ng/ml). We found normal values of NGF in the young monkey before and during the first year after NGF infusion. Conclusions. Using the enzyme immunoassay described it is possible to know the serum concentration of NGF immunoreactive in non-human primate and this assay is able to detect peripheral changes in NGF levels after intracerebral infusion of NGF.

Introducción Las concentraciones normales de factor de crecimiento nervioso (NGF, del inglés Nerve Growth Factor) en tejido y fluidos corporales son bajas (ng-pg/ml). Un método muy utilizado para cuantificar NGF es el ensayo inmunoenzimático de doble sitio con el anticuerpo 27/21 anti-NGF murino (NGFm). Material y métodos. El presente trabajo valida la utilidad de un ensayo inmunoenzimático para examinar los niveles séricos de NGF en primates no humanos normales de diferentes géneros y especies; y aplica este ensayo al estudio evolutivo de NGF en el suero de dos primates no humanos, uno joven y otro viejo, con infusión intracerebroventricular de NGFm. Para validar la detección inmunológica de NGF en suero de primates no humanos se añadió al ensayo inmunoenzimático un paso de bloqueo con anti-NGFm. Los primates no humanos normales se agruparon según los siguientes parámetros: edad (joven-adulto, n= 69, y viejo, n= 25), sexo (masculino, n= 74, y femenino, n= 20) y género o especie. Las muestras de suero de los primates no humanos con tratamiento trófico se tomaron antes y después de la infusión (semana: 1, mes: 3, 6 y 12).

Resultados Mediante la adición de un paso de bloqueo con anti-NGFm se demostró la detección inmunológica de NGF en suero de primates no humanos. Los valores de NGF encontrados en el grupo de primates no humanos jóvenes-adultos (0,152 ng/ml) son superiores a los detectados en primates no humanos viejos (0,054 ng/ml) (p< 0,01). Los niveles de NGF en el mono viejo tratado con NGF, antes (0,050 pg/ml) y durante los primeros meses posteriores al tratamiento, fueron bajos o indetectables, al año de evolución, se detectó un aumento de NGF (0,180 ng/ml) . El mono joven antes de la infusión mostró niveles similares a los del grupo control pareado en edad (0,261 ng/ml), mientras que a los dos meses posteriores al tratamiento trófico se observó un incremento (0,380 ng/ml) de NGF a nivel periférico.

Conclusión El ensayo inmunoenzimático descrito es capaz de cuantificar NGF inmunorreactivo en suero de primates no humanos y de detectar cambios periféricos en los niveles de NGF después del tratamiento intracerebroventricular con NGF. Palabras clave.