Introduction and objective. Pyroglutamyl aminopeptidase (pGluAP) is an omega peptidase which removes pyroglutamyl N­terminals residues from peptides and arylamidase derivatives. This activity is thought to be involved in the regulation of several physiological mechanisms on the central nervous system. pGluAP can modulate various susceptible endogenous substrates such as thyrotrophin­releasing hormone (TRH). It is well known that TRH plays an important role in the modulation of the behavioral changes induced by ethanol and others drugs. The aim of this work was to study the in vitro effects of ethanol (25, 50 and 100 mM) on the pGluAP activity and its ability for modulating the TRH. Material and methods. pGluAP activity was measured in synaptosomes from cerebral cortex of mouse, using pyroglutamyl­b­naphthylamide as substrate in basal and stimulated (K+ 25 mM) conditions, and in presence or absence of calcium on the buffer. Results. In basal conditions, ethanol produced an inhibition of the pGluAP activity in presence or absence of calcium, being this inhibition non dose­related. However, the stimulation with K+ 25 mM did not produce a modification of pGluAP activity in presence of calcium, but produced a light increase in absence of it. Depolarization in presence or absence of calcium and ethanol produced an inhibition of pGluAP activity, which changed in function of the ethanol concentration used. Conclusions. Ethanol modifies pGluAP activity in basal conditions by a mechanism independent of calcium, but the changes observed after the stimulation with high K+ may be due to a calcium­dependent mechanism. These variations of pGluAP activity induced by ethanol, and their effects on their endogenous substrates, specially TRH, may be responsible for the behavioral changes associated to the alcoholism and mediated by TRH.

Introducción y objetivo. El enzima piroglutamato­aminopeptidasa (pGluAP) es una omega­peptidasa que libera residuos piroglutamilo N­terminales de péptidos y derivados arilamidas. Su actividad parece estar involucrada en la regulación de diferentes procesos fisiológicos en el sistema nervioso central mediante la modificación de distintos sustratos endógenos, en especial, la hormona liberadora de tirotropina (TRH). Puesto que se sabe que la TRH desempeña un papel importante en la modulación de los cambios de comportamiento inducidos por el alcohol etílico y otras drogas, el presente trabajo se ha diseñado para estudiar el efecto in vitro del alcohol etílico (25, 50 y 100 mM) sobre la actividad del enzima pGluAP y, por lo tanto, sobre su capacidad moduladora en dicho sustrato. Material y métodos. La actividad pGluAP se determinó en sinaptosomas obtenidos de corteza cerebral de ratón, utilizando piroglutamil­b­naftilamida como sustrato, tanto en condiciones basales como tras estimulación con K+ 25 mM, en un medio de incubación en presencia o ausencia de calcio.

Resultados En condiciones basales, el etanol inhibe la actividad pGluAP tanto en presencia como en ausencia de calcio en el medio; esta inhibición no se relaciona con la dosis. Sin embargo, la estimulación con K+ 25 mM no modifica la actividad pGluAP cuando el medio de incubación contiene calcio, pero la incrementa ligeramente en su ausencia. La despolarización en presencia o ausencia de calcio y etanol en el medio provoca, en general, una inhibición de la actividad pGluAP que varía en función de la dosis de etanol utilizada.

Conclusiones El etanol modifica la actividad pGluAP en condiciones basales por un mecanismo independiente del calcio, si bien las variaciones obtenidas tras la estimulación con K+ sí ocurren por un mecanismo dependiente del calcio. Estas modificaciones de la actividad de la pGluAP debidas al etanol y, por lo tanto, sus efectos sobre sus sustratos endógenos (especialmente la TRH) podrían ser responsables en parte de los cambios comportamentales asociados al alcoholismo y mediados por la TRH.